一抗的稀释看你试验的要求了二抗你说的是酶标抗体吧，这个要稀释到工作浓度，后面的显色效果才是最佳的BSA主要是封闭液中用到，其实作用显而易见是起到封闭效果，就是结合包被过程中未结合的结合位点，提高ELISA中的；比较通用的是5%的脱脂奶粉和1%的BSA，这两种对于几乎所有的抗原都可以有封闭的作用如果你对检测的要求比较高，最好选用后者，因为前者有时会有颗粒性的杂质，其次是配制上述溶液的时候可以用PBST也可以用普通的PBS，没有太大。

封闭剂的原理就是与酶联板上未结合抗原或抗体的微孔中用封闭剂封闭上，结合抗体或抗原的时候就不会产生非特异结合了，不会影响实验的准确度tween的作用虽然不能单独封闭，但和BSA在封闭时会起到清洗非特异性结合或结合；首先，我们需要了解封闭的目的减少因非特异性结合而产生的背景其次，我们需要知道 BSA 和牛奶的区别BSA 仅由一种蛋白组成，即 60 kDa 的牛血清白蛋白而牛奶则由许多大小不一的蛋白构成所以，CST Cell Signaling。

bsa封闭液可以重复用吗

1、防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，减轻不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性的\x0d\x0a2 ELISA中也常常用到，比如封闭液，样本稀释液，酶结合物稀释液都可以用BSA\x0d\x0a3。

2、核酸杂交southern或者northern中常会用到鲑鱼精等DNA物质作为封闭液，和蛋白中的westernELISA的原理类似，但绝对不是一回事，更不会像一楼所说的那样用BSA去做核酸杂交封闭液所封闭的是膜或者说是背景，而不是靶标。

3、由于蛋白质在高浓度下保存时一般不易降解，理想的浓度为1mgml或更高因此在抗体溶液中加入蛋白质例如BSA作为稳定剂。

4、特别是用单抗腹水直接包被，因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面，业已起到了类似封闭剂的作用但在间接法测定中，封闭一般是不可少的BSA溶液配制方法 牛血清白蛋白就是我们常说的BSA牛血清白蛋白的相对。

就是结合包被过程中未结合的结合位点，提高ELISA中的特异性结合，提高实验的精确度，BSA封闭液配制方法说明BSA封闭液是由牛血清白蛋白配制而成，在酶切反应缓冲液中加入BSA；封闭功率流式试验台构成原理如图22所示它是用加载装置，即换能器将所消耗能量的一部分转换为其它形式的能量在回输给系统，从而达到即加载又节能的目的因此，在现代被测装置的性能试验中，愈来愈广泛地采用该类试验台。